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分光光度计的工作原理
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分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,扫描分光光度计,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 为吸光度;
I0为入射的单色光强度;
I 为透射的单色光强度;
T 为物质的透射率;
k 为摩尔吸收系数;
L 为被分析物质的光程,即比色皿的边长;
c 为物质的浓度;
分光光度计的应用范围
超微量紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器,无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域,还是在化工、环境检测、冶金等现代生产与管理部门,超微量紫外可见分光光度计都有广泛而重要的应用。超微量紫外可见分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析,常用于核酸,蛋白定量及细胞培养检测;超微量紫外可见分光光度计已经是现代分子生物实验室常规仪器。
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分光光度计的关键参数有哪些
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选择可见和紫外可见的分光光度计所关注的*关键的指标有三点:一是波长范围,二是波长准确度,三是杂散光参数。波长范围的选择是由用户实验需要所定,扫描分光光度计厂,波长范围越宽的价格越贵;波长准确度及杂散光参数的数值越低,表示性能越好。
影响显色反应的主要因素
(1)显色剂用量:通过实验来确定*适用量;
(2)反应液的酸碱度(pH)溶液酸碱度直接影响金属离子与显色剂存在形式以及有色化合物组成的稳定性;
(3)反应温度:不同的显色反应需要不同的反应温度,一般显色反应可在室温下完成;
(4)显色反应时间:显色反应的速度有快有慢;
(5)干扰离子的影响:应采用适当方法消除其影响;
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